Skip to main content
SUPERVISOR
Mohammadhadi Jazini dorcheh
محمد هادی جزینی (استاد راهنما)
 
STUDENT
Saeideh Mobasheri
سعیده مباشری

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده مهندسی شیمی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1395
Proteases are one of the most useful enzymes in human life. These protein degrading enzymes are naturally found in many animals and plants. Plant, animal, and microbial sources are the three major sources of these enzymes. Microbial sources is preferred due to high growth rates and low nutritional requirements. In the case of microbial resources, halophilic bacteria attract gear attentions because of low risk of contamination. Waste intestinal walls of sheep, a kind of waste animal tissues, are sources of organic compounds. The release of these wastes is an environmental concern. The most effective way to deal with these wastes is their bioconversion to valuable products. In this project, the production of protease was carried out by using halophilic bacteria cultivated on waste animal tissues to create added value. First, the wastes were alkali pre-treated. After filtration, pH adjustment, and drying, the peptone powder was produced. The produced peptone powder was compared with the commercial powder in terms of moisture, total nitrogen, ash and lipid contents as well as and elemental analysis. The results revealed similarities between the commercial and produced peptone powders. In order to evaluate the performance of the produced powder, the model yeast cultured on the two powders. The results showed the similar growth rates. The powders were used as the medium components of Salinivibrio proteolyticus . The activity of the produced protease from both powders were similar. In addition, the hydrolyzed wastes were used as a substitute for the peptone powder of the medium. Different percentage of the hydrolysate were applied (2% to 90%). The results revealed the highest activity (31.94 U/ml) at 80% hydrolysate. According to the results of this study, the peptone powder produced from waste animal tissues can be used as the substitute for commercial peptone when Salinivibrio proteolyticus used for production of protease . Keywords: halophile, animal waste tissues, hydrolytic enzyme, Salinivibrio proteolyticus , protease, extremophile, hydrolysate
پروتئازها یکی از پرنقش‌ترین آنزیم‌ها در زندگی بشر هستند. این آنزیم‌های تجزیه‌کننده پروتئین به‌طور طبیعی در بسیاری از حیوانات و گیاهان یافت می‌شوند. منابع گیاهی، حیوانی و میکروبی سه دسته عمده در تولید این آنزیم می‌باشند. از بین این منابع، تولید میکروبی به دلیل سرعت رشد بالا و نیازهای غذایی کم‌هزینه‌تر ترجیح داده می‌شود. در میان منابع میکروبی، باکتری‌های نمک دوست به دلیل عدم نیاز به استریل کردن ظرف و محیط کشت، می‌توانند هزینه‌های تولید را کاهش دهند. ضایعات کارخانه‌های وابسته به صنایع دامی یکی از پرمعضل‌ترین زباله‌های صنعتی است. هرگونه فعالیت به‌منظور امحای این‌گونه زباله‌ها علاوه بر اعمال هزینه‌های هنگفت، درنهایت نتیجه مطلوب را به دنبال نخواهد داشت. بهینه‌ترین روش در برخورد با ضایعات صنعتی، تبدیل آن‌ها به یک ماده پرارزش است. در این پروژه تولید پروتئاز با استفاده از یک نمونه باکتری نمک دوست به کمک ضایعات کشتارگاه دامی (ضایعات دیواره روده گوسفند) بمنظور ایجاد ارزش‌افزوده انجام شد. بدین‌صورت ابتدا ضایعات دیواره روده پیش‌فراوری قلیایی و پس از فیلتراسیون، تنظیم pH و خشک‌کردن، پودر پپتون تهیه‌شد. پودر پپتون تجاری و پودر پپتون تولیدی بر اساس شاخص‌های رطوبت و خاکستر، درصد لیپید، پروتئین محلول، نیتروژن کل، طیف طول‌موجی و آنالیز عنصری مقایسه شد. نتایج نشان داد که این دو پودر ازنظر خاکستر ، نیتروژن کل به روش کلدال و آنالیز عنصری ، ویژگی‌های طیفی ، فرمول شیمیایی و پپتون تولیدی و درصد اسیدآمینه به هم شباهت دارند. به‌منظور بررسی بهتر عملکرد، کشت مخمر مدل بر روی آن‌ها نشان‌دهنده شباهت این دو از منظر قابلیت رشد میکروارگانیسم بود. فعالیت پروتئاز تولیدی با این باکتری در محیط شامل پودر پپتون تولیدی و تجاری مشابه بود. تولید پروتئاز در درصدهای مختلف هیدرولیزت از 2% تا 90% انجام شد. نتایج نشان داد که بیشترین فعالیت در محیط کشت حاوی 80% هیدرولیزیت برابر با U/ml 94/31 بود. با توجه به داده‌های حاصل از این پژوهش نتیجه‌گیری می‌شود که پودر پپتون حاصل از ضایعات کشتارگاهی به دلیل شباهت به پپتون تولیدی، قابلیت استفاده به‌عنوان پودر پپتون در تهیه محیط کشت و تولید پروتئاز به‌عنوان یک محصول باارزش را دارد.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی