Skip to main content
SUPERVISOR
قباد بابایی (استاد مشاور) امیر مساح (استاد راهنما)
 
STUDENT
Saba Gharaati
صبا قرائتی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1387
Cherry leaf roll virus (CLRV) belongs to the genus Nepovirus , in the familly Comoviridae, occurs worldwide. The virus is widespread in North America, Germany, Chile, New Zealand, Australia, China, Hungary, Yugoslavia, Spain, Portugal, Japan and Turkey. Cherry leaf roll virus naturally infects a wide range of woody and herbaceous plants that the most of them belong to the genera Betula , Fagus , Juglans and Prunus . The virus infects elm, blackberry, raerry, walnut, blueberry, stone fruits and other trees and causes severe damage. It has been also detected in many herbaceous plants such as Rheum . Cherry leaf roll virus causes symptoms such as chlorotic spots, leaf curling, enation, dieback, skin cracking, and gum in sour cherry and sweet cherry. In cherry trees, flowering and leaves opening could be delayed. The fruits of infected trees show early blight and swell before maturation. CLRV has been previously reported from olive trees in Zanjan province, but there are no available molecular data for the Iranian isolates of CLRV. During the years 2009 and 2010, for detection and determination of certain molecular properties of CLRV, leaf samples showing CLRV symptoms were collected from stone fruits orchards in Charmahal va bakhtiari and Isfahan provinces. The large number of the collected samples was positive for CLRV in double antibody sandwich-enzyme linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) using a commercial polyclonal antiserum against CLRV. The infection of some ELISA positive samples was confirmed by the amplification of a DNA fragment of the expected size (286 bp) in nested-reverse transcription-polymerase chain reaction (nested-RT- PCR) and immunocapture-nested RT-PCR (IC-nested-RT-PCR) with CLRVF/CLRVR primer pair. The amplicons in four isolates including S1 (Zayanderoud border-almond), S2 (Saman -almond), S3 (Natanz-apricot), S15 (Cham-chang-apricot) were cloned and sequenced. The BLAST search revealed high similarity between the Iranian isolates and other CLRV isolates available in GenBank and the amplified segment is a part of 3' non-coding region (NCR) of RNA2. Multiple alignment of the 3'NCR of RNA2 nucleotide sequences of the Iranian isolates and those of other CLRV isolates available in GenBank showed high similarity ranging from 93.5%- 97.5% between Iranian isolates. The highest and lowest similarity were found between Cham-chang-apricot isolate and a German isolate from walnut with accession number AJ877146 (98.2%) and Saman-almond isolate and a German isolate from Sambuscus nigra with accession number AJ877138 (86.9 %.), respectively. Phylogenetic analysis indicated that CLRV isolates were divided into six different phyogenetic groups including A, B, C, E, D1 and D2. The S2 isolate was placed in the phylogenetic group D2 and S15 and S1 isolates were placed in phylogenetic group D1with some
ویروس برگ قاشقی گیلاس(CLRV) Cherry leaf roll virus از جنس Nepovirus و خانواده Comoviridae ، دارای گسترش جهانی می باشد. این ویروس به طور طبیعی دامنه وسیعی از گیاهان علفی و چوبی را آلوده می کند که مهم ترین آنها متعلق به جنس های Betula ، Fagus ، Juglans و Prunus می باشند. ویروس برگ قاشقی گیلاس، نارون، شاه توت، تمشک، گردو، زغال اخته، درختان میوه هسته دار و دیگر درختان و بوته ها را آلوده کرده و خسارت شدیدی به آن ها وارد می کند، همچنین در بسیاری از گیاهان علفی مانند ریواس نیز ردیابی شده است. این ویروس در گیلاس و آلبالو باعث ایجاد علایمی مانند لکه های کلروتیک، پیچیدگی برگ،توته، سرخشکیدگی شاخه، ترک خوردگی پوست، صمغ زدگی و زوال می شود. گلدهی و باز شدن برگ ها در درختان گیلاس ممکن است با تاخیر و ضعف همراه باشد. میوه های آلوده دچار سوختگی زودرس شده و قبل از رسیدن متورم می شوند. ویروس برگ قاشقی گیلاس از درختان زیتون استان زنجان گزارش شده است ولی هیچگونه اطلاعاتی از پراکنش و سایر میزبان های این ویروس وخصوصیات مولکولی جدایه های ایرانی آن در دسترس نمی باشد. با توجه به اهمیت ویروس برگ قاشقی گیلاس و نبود اطلاعات در زمینه پراکنش و خصوصیات مولکولی آن انجام تحقیق در این زمینه ضروری به نظر می رسد. به منظور ردیابی و تعیین برخی خصوصیات مولکولی ویروس برگ قاشقی گیلاس، در سال های 1388 و 1389 از برگ درختان هسته دار با علایم ویروسی از باغ های استان های اصفهان و چهارمحال وبختیاری نمونه برداری انجام شد. نتایج حاصل از آزمون double antibody sandwich ELISA (DAS-ELISA) با آنتی سرم چندهمسانه ای CLRV نشان دهنده آلودگی تعداد قابل توجهی از نمونه ها به این ویروس بود. همچنین آلودگی تعدادی از نمونه ها با آزمون های nested-RT-PCR و IC-nested-RT-PCR با استفاده از جفت آغازگرCLRVR CLRVF و تکثیر قطعه مورد انتظار bp 286 تایید شد. قطعات تکثیر شده همسانه سازی و تعیین توالی شدند. جدایه های توالی یابی شده شامل جدایه زردآلو چم چنگ (S15)، بادام سامان (S2)، بادام حاشیه زاینده رود (S1) وزردآلو نطنز (S3) بودند. نتایج حاصل از BLAST توالی ها نشان دهنده ویروسی بودن قطعات تکثیر شده و وجود تشابه بالای آن ها با توالی جدایه های CLRV موجود در بانک ژن بود. همچنین مشخص شد قطعه تکثیر شده شامل توالی قسمتی از ناحیه غیر قابل ترجمه آر. ان. ا. دو RNA2) (3' UTR می باشد. مقایسه توالی نوکلئوتیدی قسمتی از 3' UTR جدایه های ایرانی CLRV نشان داد که میزان تشابه بین جدایه ها از 5/93% تا 5/97% متغیر می باشد. همردیف سازی چندتایی توالی نوکلئوتیدی جدایه های ایرانی CLRV با توالی های موجود در بانک ژن نشان دهنده تشابه بالای بین آنها بود به طوری که بیشترین و کمترین میزان تشابه به ترتیب میان جدایه زردآلوی چم چنگ با جدایه گردو از آلمان با رس شماره AJ877146 (%2/98) و جدایه بادام حاشیه زاینده رود با جدایه آقطی سیاه از آلمان با رس شماره AJ877138 (%9/86) بدست آمد. رسم درخت تبارزایی بر اساس توالی نوکلئوتیدی قطعه تکثیر شده جدایه های این تحقیق به همراه سایر جدایه های این ویروس از نقاط مختلف

ارتقاء امنیت وب با وف بومی