Skip to main content
SUPERVISOR
بهرام شریف نبی (استاد راهنما) غلامرضا بلالی (استاد مشاور)
 
STUDENT
Behnaz Bagherieh
بهناز باقریه

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1393

TITLE

Identification and Determination of Anastomosis Group of Rhizoctonia, Cause of Crown and Root Rot of Potato, Bean and Onion in Frieyden, Isfahan
Rhizoctonia is one of the inhabitant Basidiomycets which is distributed unevenly in most soil and its isolation is difficult from soil. Rhizoctonia solani with AG-3 and AG-4 anastomosis groups are the most importat pathogene on plants in Isfahan region. During 2015-2016 potato, bean and onion samples were collected. Three hundred and two isolates of Rhizoctonia recognized as which based on nuclear numbers and hyphal dimentions 227 isolates were multinucleate and 25 isolates were binucleate. Anastomosis group of multinucleate were determined using 12 AG isolates. Of which AG-3, AG-4, AG-5, AG-2-1, AG-2-2, AG-13 on potato, AG-1-1, AG-2-1, AG-2-2-, AG-6, AG-4 on bean, AG-4 on onion were identified. Morphological features including form and color of colony, form, color and sclerotial formation in culture, and optimum temperature for growth were determined. Patogenecity test was performed using potato, bean and onion plants under green house condition. Based on the results obtained in this study, AG-4 and AG-2 have wide range of host than other anastomosis groups. However increasing the percentage of dead plants by AG-4 and AG-2 compared to other anastomosi groups which were identified in the three hosts, were also observed. All of the anastomosi groups which inoculated potato plant were virulent except AG-6 and AG-1 on bean plant. The highest percentage of potato plants which were inoculated by AG-3 and AG-4 were dead. All of the anastomosis groups which inoculated on bean plant except AG-5, AG-3 and AG-13 were pathogenic on potatoes. Most of dead plants were happened through inoculation of bean by AG-4. Only AG-4 which identified among three hosts was pathogen on onion. Through inoculation, symptoms of other AG didn’t observe on onion. This is the first report of AG-4 on onion and AG-13 on potato in Iran. In order to confirm morphological studies, after DNA extraction, ITS1/ITS2 and ITS1/ITS4 primer pairs we used. Amplified DNA was sequenced. The results of the Blast revealed the 99 and 100% similarity of isolates of Rhizoctonia to available sequences in Gen Bank. Due to the wide distribution of AG-4 on each hosts including potatoes, beans and onions and formation of sclerotia in the soil.The results of this study showed that crop rotation with these hosts need to be done carefully. Keywords : Isolation, culture media, Rhizoctonia solani , anastomosis group
ریزوکتونیا از جمله قارچ های بازیدیومیست خاکزی است که در بیشتر خاک ها به صورت غیر یکنواخت وجود دارد. گونه ی Rhizoctonia solani با گروه آناستوموزی AG-3 ، AG-4 و AG-2 بیمارگر مهم و عامل بیماری مرگ گیاهچه و پوسیدگی ریشه در بسیاری از گیاهان از جمله سیب زمینی، لوبیا و پیاز در اصفهان است. در طی سال های 1394 و 1395 از مزارع سیب زمینی، لوبیا و پیاز مناطق مختلف استان اصفهان نمونه برداری انجام شد. سیصد و دو جدایه ی ریزوکتونیا از نمونه ها بدست آمد و پس از شمارش هسته در هر سلول و تعیین قطر ریسه، 277 جدایه چند هسته ای و 25 جدایه دو هسته ای شناسایی گردید. گروه آناستوموزی همه ی جدایه ها به روش باندونی و با داشتن دوازده گروه آناستوموزی استاندارد (مرجع) تعیین شد. دوازده گروه آناستوموزی از هر سه میزبان سیب زمینی، لوبیا و پیاز شناسایی شدند. گروه های آناستوموزی شناسایی شده از سیب زمینی شامل AG-2-1، AG-2-2 ، AG-3، AG-5، AG-4 ، AG-13، از لوبیا شامل AG-6، AG-1-1،AG-2-1 ، AG-2-2 ، AG-4 و از پیاز تنها AG-4 شناسایی شد. ویژگی های مورفولوژیکی شامل شکل و رنگ پرگنه، شکل، رنگ و چگونگی تشکیل اسکلروت در محیط کشت و دمای بهینه ی رشد تعیین شد. اثبات بیماری زایی جدایه ها روی گیاهان سیب زمینی ، لوبیا و پیاز در شرایط گلخانه انجام شد. بر اساس نتایج بدست آمده در این پژوهش،AG-4 و AG-2 دارای دامنه ی میزبانی وسیع تری نسبت به سایر گروه های آناستوموزی بودند. همچنین افزایش درصد گیاهان مرده توسط AG-4 و AG-2 نسبت به سایر گروه های آناستوموزی شناسایی شده از هر سه میزبان، مشاهده گردید. همه ی گروه های آناستوموزی مایه زنی شده به سیب زمینی به جز AG-6 و AG-1-1 لوبیا، روی این گیاه بیماریزا بودند. در گیاه سیب زمینی بیشترین درصد گیاهان مرده به ترتیب در اثر مایه زنی AG-3 و AG-4 بود. همه ی گروه های آناستوموزی مایه زنی شده به گیاه لوبیا به جز AG-5، AG-3 و AG-13 سیب زمینی، روی این گیاه بیماری زا بودند. در گیاه لوبیا بیشترین درصد گیاهان مرده در اثر مایه زنی AG-4 بود. تنها، AG-4 شناسایی شده از هر سه میزبان گیاهی، روی پیاز بیماری زا بودند. در اثر مایه زنی سایر گروه های آناستوموزی روی گیاه پیاز علائمی مشاهده نگردید. این پژوهش اولین گزارش از AG-4 پیاز و AG-13 سیب زمینی در ایران می باشد. در جهت تایید بررسی های مورفولوژیک، پس از استخراج DNA ژنومی، منطقه ی ITS ژنومی R. solani با دو جفت آغازگر عمومی ITS1/ITS2 و ITS1/ITS4 تکثیر و محصول PCR توالی یابی گردید. توالی ها با ترادف های موجود در بانک ژن با استفاده از نرم افزار nc-BLAST بلاست گردید. نتایج حاصل از بلاست نشان دهنده ی شباهت 99 و 100 درصدی جدایه های ریزوکتونیا با توالی های موجود در بانک ژن بودند. نتایج بدست آمده از این پژوهش نشان داد که با توجه به پراکنش وسیع AG-4 روی هر سه میزبان سیب زمینی، لوبیا و پیاز، همچنین تشکیل اسکلروت ها در خاک، در برنامه تناوب زراعی با این میزبان ها، دقت بیشتری باید انجام شود. کلمات کلیدی: شناسایی، محیط کشت، R . solani ، گروه های آناستوموزی

ارتقاء امنیت وب با وف بومی