Skip to main content
SUPERVISOR
Fatemeh Pikanhirati,Salar Dorafshan
فاطمه پیکان حیرتی (استاد راهنما) سالار درافشان (استاد مشاور)
 
STUDENT
Pejman Khalili
پژمان خلیلی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده منابع طبیعی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1394

TITLE

The effect of Early heat shock on some oxidative stress and Immunity Indicatorsof of Caspian salmon (Salmo trutta caspius) at Early Development Stages
The aim of the present study was to examine the effect of heat shock for triploidy induction on oxidative stress and immunity indicators of the Caspian Salmon ( Salmo trutta caspius ) during the early development stages (fertilized egg, eyed egg, hatching and active swimming).In this study, 6 female broodstock and 9 male broodstock were used.The gametes of each sex breeders were pooled together to eliminate individual effects. For triploidy induction, temperature shock was applied 40 minutes after fertilization at 26 °C for 10 minutes. The eggs belonged to heat shock treatment and the diploid (control) treatment incubated under natural conditions at 10-12 °C and cultured for up to 84 days after fertilization. The results showed that polyploidy induction rate was 81% in trypoloid treatment in active swimming stage, which was measured through the dimensions of red blood cells. To ensure the accuracy of triploid induction, flow cytometry method was used and the triploidy was proven. The primary and final weight of the diploid larvae were significantly higher than those of the heat shock group, while the weight gain percentage was not significantly different between the diploid larvae and heat shock group. Sampling was performed 3 hours, 32 days and 45 days after fertilization for fertilized egg, eyed egg and hatched egg, respectively, for active swimming larvae sampling was performed in 64 days post fertilization. All samples collected in 3 replication for each treatment. The results showed that activity of antioxidant enzymes Super Oxide Dismutase (SOD), Catalase (CAT) and Glutathione Peroxidase (GPX) in the beginning of embryo development in diploid and heat shock treatments were low, but in the later stages of life, the activity of these enzymes increased. The levels of SOD, CAT and GPX enzymes change at fertilized egg, eyed egg and hatching stages in the heat shock treatment were significantly higher than the diploid treatment. In diploid and heat shock treatments, increased levels of Malondialdehyde (MDA) were obsereved which related to start of active feeding. Also, high levels of MDA were observed in heat shock treatment in stages of fertilized, eyed and hatching egg in comparison to diploid treatment. In present study, the level of immunity variables in different stages of embryonic development was significantly different between the two treatments. The levels of Immunoglobulin (IgM) were higher in stages of fertilized egg and eyed egg, total protein in stages of fertilized egg and hatching and globulin in stages of eyed egg and active swimming, respectively, in heat shock treatment. The concentrations of lysozyme, complementarity alternate (ACH 50 ), albumin, immunoglobulin (IgM), total protein and globulin factors in heat shock treatment were similar or higher than these of in diploid treatment, which indicates that the fish immune system was not disrupted because of triploidy induction. Keywords : Oxidative stress, immunity, Triploid, Caspian Sea salmon, Embryo development
هدف در مطالعه حاضر بررسی شوک حرارتی به منظور القای تریپلوئیدیبر شاخص‌های استرس اکسیداتیو و ایمنی در ماهی آزاد دریای خزر ( Salmo trutta caspius ) در مراحل ابتدایی نمو جنینی (تخم لقاح یافته، چشم زدگی، تفریخ و شنای فعال) بود. در این مطالعه از 6 ماهی مولد ماده و 9 ماهی مولد نر استفاده شد که محصولات تناسلی حاصل از مولدین به‌منظور حذف اثرات فردی باهم مخلوط شدند. برای القای تریپلوئیدی از شوک دمایی، 40 دقیقه بعد از لقاح با دمای 26 درجه سانتی‌گراد به مدت 10 دقیقه استفاده شد. تخم‌های متعلق به تیمارشوک حرارت دیده و تیمار دیپلوئید تحت شرایط طبیعی در دمای 12-10 درجه سانتی‌گراد دوره انکوباسیون را سپری کردند و تا 84 روز بعد از لقاح پرورش داده شدند. نتایج در این آزمایش نشان داد درصد القای پلی پلوئیدی در مرحله شنای فعال در تیمار تریپلوئیدی 81 درصد بود که با اندازه‌گیری ابعاد گلبول های قرمز به دست آمد که جهت اطمینان از صحت القای تریپلوئیدی از روش فلوسایتومتری استفاده شد که نتایج حاصل از این روش القاء تریپلوئیدی را به اثبات رساند. وزن اولیه و نهایی بچه ماهی‌های دیپلوئید به‌طورمعنی‌داری بیشتر از بچه ماهی‌های گروه شوک حرارتی بود در حالی درصد افزایش وزن بین بچه ماهی‌های دیپلوئید و گروه شوک حرارتی تفاوت معنی‌داری نداشت. نمونه‌گیری از تخم‌های لقاح یافته 3 ساعت پس از لقاح، تخم چشم زده 32 روز پس از لقاح، لارو تفریخ شده 45 روز پس از لقاح و لارو در مرحله شنای فعال 64 روز پس از لقاح از 2 تیمار مورد مطالعه در 3 تکرارانجام شد. نتایج حاصل از این مطالعه، فعالیت اندک آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی سوپراکسید دیسموتاز(SOD) ، کاتالاز(CAT) و گلوتاتیون پراکسیداز(GPX) را در ابتدای تشکیل و رشد جنین در تیمارهای دیپلوئید و شوک حرارت دیده نشان داد، اما در مراحل بعدی زندگی فعالیت این آنزیم‌ها روند افزایشی به خود گرفت. میزان آنزیم‌های SOD، CAT و GPXدر مراحل تخم لقاح یافته، چشم زدگی و تفریخ تیمارشوک حرارت دیدهبه‌صورتمعنی‌داری بیشتر از دیپلوئید بود. در این مطالعه در تیمارهای دیپلوئید و شوک حرارت دیده افزایش سطوح مالون دی آلدهید(MDA) متناسب با روند تکامل و شروع تغذیه فعال مشاهده شد. همچنین سطوح بالای MDA در تیمار شوک حرارت دیده در مراحل تخم لقاح یافته، چشم زدگی و تفریخ نسبت به تیمار دیپلوئید مشاهده شد.در مطالعه حاضر،سطح متغیرهای ایمنی در مراحل مختلف نمو جنینی در گروه دیپلوئید و شوک حرارت دیده متفاوت بود. میزان ایمونوگلبولین ((IgM، پروتئین کل و گلوبولین به ترتیب در مراحل تخم لقاح یافته و چشم زدگی، تخم لقاح یافته و تفریخ، چشم زدگی و شنای فعال در تیمار شوک حرارت دیده بیشتر بود. غلظت فاکتورهای لیزوزیم، آلترناتیو کمپلمان(ACH 50 )، آلبومین،ایمونوگلبولین(IgM)، پروتئین کل، گلوبولین در تیمار شوک حرارت دیده مشابه با تیمار دیپلوئید یا بیشتر بودند که نشان می‌دهد سیستم ایمنی در ماهی درنتیجه القای تریپلوئیدی دچار اختلال نشده است. کلمات کلیدی : استرس اکسیداتیو، ایمنی، تریپلوئیدی، ماهی آزاد دریای خزر، نمو جنین

ارتقاء امنیت وب با وف بومی