Skip to main content
SUPERVISOR
محسن سلیمانی امین آبادی (استاد مشاور) منصوره ملکیان (استاد راهنما)
 
STUDENT
Zahra Aliporasdabad
زهرا علی پوراسدآباد

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده منابع طبیعی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1391
A wide range of organic chemicals enter into the environment intentionally or unintentionally, creating public concern. Petroleum hydrocarbons are one of these organic pollutants with various hazards to terrestrial and marine ecosystems. We need cost effective technologies for restoration of contaminated sites. Bioremediation is one the methods which has been used in recent decades. In this method microrganisms and plants are used to remove degrade or stabilize pollutants. In the current study, oil degrading bacteria were investigated in petroleum contaminated soils of five oil refineres (Tehran, Shiraz, Isfahan, Abadan, Tabriz). Soil samples were collected and some physical and chemical characteristics including organic carbon, microbial respiration, percentage of lime, concentrations of petroleum hydrocarbons and heavy metals were measured. Oil degrading bacteria were isolated and purified after enrichment stage. 12 strains with the highest growth in a medium containing crude oil were selected for identification. DNA was extracted from the selected strains and a fragment of 16SrRNA gene was sequenced. Genetic diversity of the obtained sequences were investigated and phylogenetic trees were constructed using software MEGA v.4. Identified bacteria belonged to 5 species: Achromobacter spanius , Klebsiella quasipneumoniae , Ochrobactrum intermedium , Citrobacter amalonaticus , Pseudomonas aeruginosa . Growth and decomposition ability of these bacteria in media containing light and heavy diesel and crude oil were examined. Bacteria with the greatest growth and decomposition ability of crud oil, light and heavy diesel were Citrobacter amalonaticus , Klebsiella quasipneumoniae in and Ochrobactrum intermedium , respectively. Two A and B consortiums of bacteria were prepared. Consortium A was made of all five bacteria which showed the greatest growth in heavy diesel. Consortium B consisted of three bacteria ( Citrobacter amalonaticus , Klebsiella quasipneumoniae in and Ochrobactrum intermedium ) with the highest growth in crude oil. Thus, consortium A, B, could be used for decomposiion of heavy diesel and crude oil, respectively.The species diversity was evaluated, which showed a high diversity of oil degrading bacteria in the selected sites. Based on the results, it is recomended to investigate the ability of the identified bacteria in petroleum contaminated terrestrial and aquatic environments. Keywords: Soil, Petroleum hydrocarbons, Bacteria, Bioremediation, Genetic diversity, 16S rRNA gene
طیف گسترده ای از مواد آلی شیمیایی عمداً یا سهواً وارد محیط زیست می شوند که نگرانی های عمومی را پدید می آورند. هیدروکربن های نفتی یکی از انواع آلاینده های آلی هستند که ورودشان به اکوسیستم های دریایی و خاکی مخاطرات زیادی به دنبال دارد. در حال حاضر نیاز به فن آوری های با صرفه از نظر اقتصادی برای بازسازی مکان های آلوده وجود دارد. یکی از روش هایی که در دهه های اخیر مورد توجه قرار گرفته، زیست پالایی است. در این روش از میکروارگانیسم ها و گیاهان برای رفع، حذف یا تثبیت مواد آلاینده استفاده می شود. در این پژوهش، باکتری های تجزیه کننده نفت در خاک های آلوده به مواد نفتی از 5 پالایشگاه کشور (تهران، شیراز، اصفهان، آبادان و تبریز) مورد بررسی و شناسایی قرار گرفت. پس از جمع آوری نمونه های خاک، برخی از خصوصیات فیزیکی و شیمیایی خاک مانند تنفس میکروبی، کربن آلی، درصد آهک، غلظت کل هیدروکربن های نفتی و غلظت فلزات سنگین اندازه گیری شد. باکتری های تجزیه کننده نفت پس از مرحله غنی سازی، از محیط کشت جداسازی و خالص سازی گردید. از بین سویه هایی که در محیط کشت حاوی نفت خام رشد بیشتری داشتند، 12 سویه برای شناسایی انتخاب شدند. سویه های انتخاب شده به روش مولکولی با استخراج DNA و توالی یابی ژن 16S rRNA شناسایی گردید. تنوع ژنتیکی توالی های حاصل بررسی و درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار مگا نسخه 4 ترسیم شد. باکتری های جداسازی شده به 5 گونه Achromobacter spanius ، Klebsiella quasipneumoniae ، Ochrobactrum intermedium ، Citrobacter amalonaticus و Pseudomonas aeruginosa تعلق داشتند. میزان رشد و تجزیه مواد نفتی توسط باکتری های مذکور در دیزل سبک، دیزل سنگین و نفت خام بررسی گردید. بیشترین میزان رشد و تجزیه در نفت خام، دیزل سنگین و دیزل سبک به ترتیب مربوط به باکتری های Citrobacter amalonaticus ، Ochrobactrum intermedium و Klebsiella quasipneumoniae بود. در این مطالعه دو کنسرسیوم A و B تهیه شد. کنسرسیوم A متشکل از 5 باکتری شناسایی شده، بیشترین رشد را در دیزل سنگین نشان داد. کنسرسیوم B متشکل از سه باکتری Achromobacter spaniu ، Klebsiella quasipneumoniae و Ochrobactrum intermedium بود که بیشترین رشد را در نفت خام داشت. بنابراین کنسرسیوم A و B به ترتیب برای تجزیه دیزل سنگین و نفت خام پیشنهاد می شوند. تنوع باکتری ها با استفاده از شاخص های تنوع گونه ای بررسی شد. نتایج نشان داد که تنوع بالایی از باکتری های تجزیه کننده مواد نفتی در خاک های مورد مطالعه وجود دارد. با توجه به نتایج حاصل از این تحقیق، بررسی پتانسیل باکتری های شناسایی شده در محیط های آبی و خاک های آلوده به هیدروکربن های نفتی به منظور پاکسازی این آلاینده ها توصیه می شود. کلمات کلیدی : خاک، هیدروکربن های نفتی، باکتری، زیست پالایی، تنوع زیستی، ژن16S rRNA

ارتقاء امنیت وب با وف بومی