Skip to main content
SUPERVISOR
Ali asghar Ensafi,Behzad Rezaei
علی اصغر انصافی (استاد راهنما) بهزاد رضائی (استاد مشاور)
 
STUDENT
Sana Karbalaei
ثنا کربلائی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده شیمی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1390

TITLE

Construction of DNA-based Biosensor for Determination of Glutathione and Naringin and Assessment of Antioxidant Effect of Glutathione
This research introduced a sensitive and novel electrochemical DNA-based biosensor for the measurement of naringin and glutathione using differential pulse voltammetry (DPV). This biosensor was based on ds-DNA / poly (diallyldimethylammonium chloride) (PDDA)/ multiwall carbon nanotubes (MWCNTs) modified pencil graphite electrode (PGE) for monitoring the guanine and adenine oxidation signals. The surface morphology of these modified electrode was studied with scanning electron microscopy (SEM). The results showed that the chemically modified electrode exhibited considerable sensitivity. Different parameters on the response of measurement of naringin and glutathione such as concentration of ds-DNA, time of interaction between ds-DNA and mentioned materials, type of buffer and other parameters are optimized. Under the optimized conditions using differential pulse voltammetry two linear segments were obtained for naringin. First segment from 0.058 to 5.80 mg.L -1 and the second one was from 5.80 to 580.0 mg.L -1 , with a detection limit of 0.0103 mg.L -1 . The relative standard deviation of five repeated measurements of 5.80 mg.L -1 naringin was 3.78 and 4.23 % for oxidation signal of guanine and adenine, respectively. The interference of foreign substances was investigated. This electrochemical biosensor was applied to analyze naringin in various citrus juices. Finally, the determination of glutathione also have been studied at the modified pencil graphite electrode with dsDNA/MWCNTs-PDDA using DPV. After interaction of dsDNA with glutathione by using of increscent of oxidation signals of guanine and adenine was measured glutathione. The detection limit was obtained 0.0071 mg.L -1 . The proposed method was used for determination of glutathione in plasma and urine.
در این تحقیق یک زیست‌حسگر الکتروشیمیایی جدید جهت بررسی برهمکنش‌ گلوتاتیون و نارینگین با DNA و اندازه‌گیری آن‌ها در نمونه‌های حقیقی ارائه شده ‌است. در تهیه این زیست‌حسگر‌ از نانو‌لوله‌های کربنی چند دیواره‌ای ((MWCNTs با ساختار‌ نانومتری استفاده شده‌ استDNA . به عنوان یک پلی‌آنیون آب‌دوست می‌تواند با تشکیل پیوند‌های کووالانسی و غیر‌کووالانسی روی MWCNTs تثبیت شود. در ابتدا سطح الکترود گرافیت مداد PGE) ) فعال شد. سپس از یک پلیمر کاتیونی برای پخش کردن MWCNTs روی سطح PGE استفاده شد. این پلیمر کاتیونی به تثبیت DNA بر روی MWCNTs و الکترود گرافیت مدادی کمک می‌کند. با بهره‌گیری از زیست‌حسگر ساخته‌شده و روش ولتامتری پالس تفاضلی عوامل مؤثر بر حساسیت روش از جمله غلظت DNA، مقدار MWCNTs، مدت زمان تثبیت DNA روی سطح الکترود، مدت زمان بر‌همکنش ترکیبات موردنظر با DNA و...... بهینه شد. سپس تحت شرایط بهینه مقدار نارینگین وگلوتاتیون در نمونه‌های حقیقی اندازه‌گیری ‌شد. با استفاده از روش ولتامتری پالس تفاضلی منحنی تنظیم برای دو ترکیب نام‌برده بدست آمد.برای نارینگین منحنی تنظیم در دو محدوده غلظتی80/5-058/ و 0/580-80/5 میلی‌گرم بر لیتر با حد تشخیص 0103/0 میلی‌گرم بر لیتر به‌دست آمد. برای گلوتاتیون منحنی تنظیم در دو محدوده غلظتی 07/3-0307/0 و3/307-07/3 میلی‌گرم بر لیتر با دو شیب متفاوت و حد تشخیص 0071/0 میلی‌گرم بر لیتر حاصل شد. گزینش پذیری روش برای تعیین ترکیبات مورد نظر در حضور گونه های مختلف مزاحم مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از اندازه‌گیری نارینگین در آب‌میوه مرکبات و گلوتاتیون در نمونه‌های ادرار و پلاسما نشان داد که سیستم قابلیت و کارآیی بالایی در اندازه‌گیری مقادیر کم دارد.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی