Skip to main content
SUPERVISOR
Taghi Khayamian,Kazem Karami,Mohammad taghi Jafari
تقی خیامیان (استاد راهنما) کاظم کرمی (استاد مشاور) محمد تقی جعفری (استاد راهنما)
 
STUDENT
Nazanin Hashemzadeh esfahani
نازنین هاشم زاده اصفهانی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده شیمی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1393
The aim of this study is to investigate of complex [Pd 3 (C,N-(C 6 H 4 C(Cl)=NO)-4) 6 ] in free mode and loading on nanoparticles on stabilizing a portion of telomeric DNA, called Gquadruplex DNA with the sequence of 5?-G 3 (T 2 AG 3 ) 3 -3?. By titration absorption methods, the binding constant between complex and G-q DNA was found to be (K b =4.5×10 6 M ?1 ) and showed that this interaction is more selective than ligand (K b =3.5×10 5 M ?1 ) or duplex DNA (K b =1.5×10 5 M ?1 ). Type of interaction using titration absorption, thermal denaturation, and fluorescence competitive experiments was investigated and all three represented the groove binding.The thermodynamic parameters were measured by thermal denaturation experiment and the negative value of ?G°=-8.24 kcal mol ?1 indicated spontaneously interaction and represented, with increasing in the concentration of the complex from 1 to 120 ?M, melting denaturation was shifted and increased, therefore, interactions was bimolecular and also confirmed complex as an stabilizer on G-q DNA structure. In order to make more effective use of the drug and remove undesirable side effects, drug delivery system with nanoparticles was chosen. The reason of synthesis BSA nanoparticles and cellulose as drug delivery system is biodegradable/biocompatible properties. The complex was loaded on them and then the release of drug from was investigated in vitro and were compared with each other and with complex free form. The results showed BSA were better candidates as carriers because of smaller size and lower release. Interaction of complex adsorbed on BSA nanoparticles and G-q DNA was also studied and its comparison with the free mode showed the most effective interaction. The number of binding sites was calculated by Job plot technique and was found to be 2:1 that represented 2 of complexes connected to each G-q DNA. In the end, in biological studies, value of IC 50 =50 ?M showed that the complex has significant antitumor activities against MCF-7 (breast cancer) cells then this complex can inhibit telomerase by establish of G-q DNA structure.
هدف از این پایان‌ نامه بررسی کمپلکس [Pd 3 (C,N-(C 6 H 4 C(Cl)=NO)-4) 6 ] به صورت تنها و بارگذاری شده روی نانوذرات بر پایداری قسمتی از DNA تلومریک انسانی به نام DNA چهار‌‌‌گانه با توالی 5?-G 3 (T 2 AG 3 ) 3 -3? می‌باشد. با استفاده از روش تیتراسیون طیف سنجی جذب، ثابت اتصال بین کمپلکس پالادیم و DNA چهارگانه اندازه‌گیری شد و مقدار (M -1 ?? ? ×(5/?±)5/4K b =) نشان داد از لحاظ انتخاب‌ پذیری، کمپلکس فوق نسبت بهDNA چهارگانه در مقایسه با DNA دورشته‌ای (M -1 ?? 5 ×5/1K b =) و لیگاند (M -1 ?? 5 ×(5/?±)5/3K b =) واکنش پذیرتر است. نوع برهمکنش با استفاده از تکنیک‌های تیتراسیون جذبی، واسرشت حرارتی و آزمایش فلورسانس رقابتی مورد بررسی قرار گرفت و با توجه به نتایج، هر سه اتصال از نوع شیاری بین کمپلکس پالادیم و ساختار چهارگانه DNA را نشان دادند. با آزمون واسرشت حرارتی پارامترهای ترمودینامیکی با مقادیر kcal mol ?1 ??/??- =?H O ، kcal mol ?1 ??/??- =?S O و kcal mol ?1 24/? - برای?G O محاسبه و تفسیر شدند که با توجه به مقدار منفی انرژی آزاد گیبس، خود به خودی بودن و تمایل این دو به برهمکنش با هم مشخص شد، همچنین با این تکنیک معلوم شد به ازای افزایش غلظت کمپلکس تا بیش از صد برابر، دمای ذوب DNA چهارگانه تا O C55 افزایش می‌یابد که این نتیجه واکنش این دو از نوع بین مولکولی را نشان می‌دهد همچنین ثابت می‌کند کمپلکس قادر است با اتصال به ساختار چهارگانه حالت آن را پایدار کند و باعث شود رشته های آن سخت‌تر از هم گسسته شوند. به منظور تاثیر بیشتر دارو و حذف اثرات جانبی نامطلوب، سیستم دارورسانی هدفمند با استفاده از نانوحامل‌ها انتخاب گردید، نانوذرات آلبومین سرم گاوی و سلولز جلبک با نام علمی کارا ساخته شدند و بارگذاری کمپلکس پالادیم روی آنها صورت گرفت، علت انتخاب این نانو حامل‌ها از نظر بیولوژیکی قابل تخریب بودن و سازگاری با بدن انسان است. رهایش کمپلکس از نانوحامل‌ها در محیط آزمایشگاهی مورد بررسی قرار گرفت و با یکدیگر و با حالت آزاد کمپلکس مقایسه شد، نتایج نشان داد نانوذرات آلبومین به علت داشتن اندازه کوچکتر و رهایش آهسته‌تر کاندید مناسب‌تری بعنوان حامل دارو هستند. برهمکنش کمپلکس بارگذاری شده روی نانوذرات A به عنوان نانوذرات برتر با DNA چهارگانه نیز صورت گرفت و مقایسه‌‌ی ثابت اتصال بدست آمده با مقدار (M -1 ?? ? ×7K b =) نسبت به حالت آزاد کمپلکس، نشان از واکنش مؤثرتر آن داد. برای تعیین استوکیومتری اتصال بین کمپلکس پالادیم و DNA چهارگانه از منحنی کار (Job plot) استفاده شد که نسبت ? به ? نشان می‌دهد به ازای هر مول DNA چهارگانه، دو مول کمپلکس به آن متصل شده است. در آخر فعالیت ضد سرطانی کمپلکس روی سلول‌های سرطان سینه با رده MCF-7 مورد بررسی قرار گرفت وM ?50 IC 50 = حاکی از سمیت مطلوب آن بر روی این نوع خاص از سرطان بود، در نتیجه این کمپلکس قابلیت این را دارد که با پایدار کردن حالت چهارگانه DNA، آنزیم تلومراز را مهار کند.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی