Skip to main content
SUPERVISOR
Ali asghar Ensafi
علی اصغر انصافی (استاد راهنما)
 
STUDENT
Elham Mirmomtaz
الهام میرممتاز

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده شیمی
DEGREE
Doctor of Philosophy (PhD)
YEAR
1383
A nanografting method was used to fabricate well packed ss-DNA nanopatches within a SAM of inert thiols on gold surfaces. Accurate height and compressibility measurements of the nanopatches before and after hybridization allowed reliable, sensitive, and label-free detection of hybridization. Side-by-side comparison of SAM and nanografted DNA-monolayers shows that the latter display higher hybridization efficiencies. A p -aminophenol modified carbon paste electrode ( p -APMCPE) was constructed for the determination of 6-thioguanine (6-TG). The cyclic voltammogram showed that the electrocatalytic oxidation of 6-TG occurs at the surface of p -APMCPE. The kinetic parameters such as electron transfer coefficient and rate constant were determined for the chemical reaction between 6-TG and p -aminophenol. A sensitive square wave voltammetry (SWV) method was used for the determination of 6-TG at the surface of mercury electrode. The interaction of 6-TG with ds-DNA resulted in the amplification of SWV response. SWV and UV–vis studies showed that the intercalation of 6-TG into ds-DNA would be the probable reason for the observed behavior. A sensitive differential pulse voltammetry (DPV) procedure was introduced for the determination of amiloride at a ds-DNA-modified pencil graphite electrode (PGE). The decrease in the oxidation signal of guanine and adenine was obtained before and after interaction with amiloride. UV–vis measurements combined with DPV showed that the most plausible mechanism for the interaction of amiloride and ds-DNA would be the intercalation.
در این تحقیق نشان داده شد که دانسیته بالای مولکولهای پروب مسئول عدم وقوع هیبریداسیون در ss-DNA-SAM با دانسیته بالا نمی باشد، بلکه عدم نظم مولکولهای ss-DNA سبب این امر می باشد. بدین منظور، از تکنیک نانوگرافتینگ جهت ساخت نانو ساختارهای ss-DNA در ماتریکسی از مولکولهای آلکان تیول بر روی سطح طلای بسیار هموار استفاده شد. دانسیته سطحی ss-DNA با تغییر پارامترهای ایجاد نانوساختار نظیر غلظتDNA و تعداد خطوط روبش تغییر داده شد. از آنجا که ss-DNA در مقابل ds-DNA در حدود 50 برابر قابل انعطاف تر است، در اثر هیبریداسیون مولکولهای ss-DNA با تبدیل به ds-DNA به فرم ایستاده تبدیل می شوند. از این رو، با استفاده از اندازه گیری ارتفاع و اندازه گیری قابلیت انعطاف پذیری قبل و پس از هیبریداسیون می توان این فرایند را با اطمینان و حساست بالا و بدون نیاز به نشاندار کردن آشکارسازی کرد. مقایسه هیبریداسیون در نانوساختار -DNA و ss-DNA-SAM نشان می دهد که، اگرچه در نانوساختار دانسیته بالاتر است، اما هیبریداسیون نیز راندمان بیشتری نشان می دهد. در بخش دیگر کار، یک الکترود خمیر کربنی اصلاح شده با پارا- آمینوفنول ( p -APMCPE) جهت اندازه‌گیری داروی ضد سرطان تیوگوانین (6-TG) طراحی و ساخته شد. نتایج ولتامتری موج مربعی نشان داد که پیک اکسیداسیون الکتروکاتالیستی 6-TG دو ناحیه خطی در محدوده 20/0 تا 0/8 و 0/8 تا 0/350 میکرو مولار با حد تشخیص 80 نانو مولار دارد. پارامترهای سنیتیکی درگیر در واکنش 6-TG با سایت فعال در الکترود p -APMCPE مانند تعداد الکترون درگیر در مرحله تعیین کننده سرعت، ثابت سرعت و ضریب نفوذ 6-TG به سطح الکترود بدست آمد. در بخش دیگر تحقیق از روش ولتامتری موج مربعی (SWV) جهت اندازه‌گیری کمی داروی ضد سرطان 6-TG براساس بر همکنش آن با dsDNA در محلول بافر استاتی (8/4pH=) استفاده شده است. سپس با استفاده از روش ولتامتری عاری‌سازی عمل تغلیظ بر روی سطح الکترود جیوه HMDE و به دنبال آن روبش پتانسیل با استفاده از روش DPV انجام می‌گیرد. نتایج نشان داد در غلظت 0/2 میلی‌گرم بر لیتر dsDNA و در پتانسیل تغلیظ 10/0- ولت و در زمان تغلیظ 30 ثانیه در محدود? وسیع غلظتی 9- 10×4/2 تا 5- 10×8/1 مولار 6-TG منحنی جریان نسبت به غلظت 6-TG خطی است. حد تشخیص 1/2 نانو مولار با استفاده از روش فوق به دست آمد. نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که بر همکنش 6-TG با dsDNA در فاز محلول در بافر استاتی به صورت اینترکلیشن انجام می‌گیرد. در ادامه تحقیق، یک سنسور حساس جهت اندازه‌گیری داروی آمیلوراید بر روی الکترود گرافیت مدادی اصلاح شده با dsDNA بر اساس بر همکنش dsDNA با آمیلوراید ساخته شد. با استفاده از روش ولتامتری عاری‌سازی جذبی، dsDNA در بافر استاتی بر روی الکترود تثبیت شد. با استفاده از روش ولتامتری پالس تفاضلی، اختلاف سیگنال بازهای آدنین و گوانین قبل و بعد از بر همکنش dsDNA با آمیلوراید بدست آمد. در شرایط بهینه شیمیایی و دستگاهی منحنی کالیبراسیون از طریق دنبال کردن کاهش سیگنال آدنین و گوانین بعد از بر همکنش dsDNA با آمیلوراید در محدوده خطی 75/0 تا 0/240 میکرومولار با حد تشخیص 5/0 میکرومولار بدست آمد. مطالعات DPV و UV-Vis به منظور بررسی مکانیسم بر همکنش دارو و dsDNA انجام گرفت که نشان دهنده بر همکنش از نوع اینترکلیشن می باشد.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی