Skip to main content
SUPERVISOR
Jamshid Razmjoo ghalaie,Masoud Bahar
جمشید رزمجو (استاد راهنما) مسعود بهار (استاد راهنما)
 
STUDENT
Banafsheh Jalalzadeh Moghadam Shahr
بنفشه جلال زاده مقدم شهری

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1382

TITLE

Diversity Among Indigenous Rhizobia Nodulating Clover Species in Iran
In order to study genetic structure of strains of Rhizobium leguminosarum bv. trifolii recovered from some species of clover in soils of different parts of Iran, soil samples were collected from various geographical regions of the country, including Lorestan, Isfahan, Khorasan, Hamedan, Kermanshah, Kordestan and West Azerbaijan. Clover species including Bersim clover, Persian clover and Red clover were grown in these soils. Following nodulating soil Rhizobia on the host roots, bacteria were isolated from nodules and a bacterial collection containing 420 isolates was provided. Strains of R . leguminosarum bv. trifolii were characterized using BOX-PCR fingerprinting method. At first, the isolates from each 21 soil-species treatments were compared. Second step of comparison was performed among selected isolates of the first step in each soil sample and final step of caparison was done between isolates from different soil samples. The number and frequency of isolates was determined using strain richness and strain dominance indices. Natans soil-Persian clover treatment with strain richness of 0.62 showed the most diversity among all the investigated treatments. Kermanshah soil sample with SR of 0.33 and Lorestan soil sample with the SR of 0.12 were the most and the least diverse soil samples respectively. The values of strain richness for the clover species were estimated 0.3 for Red clover, 0.28 for Persian clover and 0.23 for Bersim clover. From 152 isolates that were investigated in this study, 23 strain types relating to three clover species recognized, which strain number 9 with SR of 0.16 was the most dominant strain of all. Profile generated by BOX-PCR was used to estimate genetic similarity of the strains, using Jacard similarity coefficient, and a cluster was constructed according to UPGMA method at NTSYS.2.0 software. Comparison of similarity coefficients and relating dendrogram did not reflect any special relation between strain of rhizobia strain, clover species and soil sample. In order to investigate phylogenetic relationships, strains were characterized by RFLP of recA gene. Results indicated that all the isolates belong to the same specie. Also the strains were subjected to melanin production and salt resistant tests, which the results of the two were negative. A primer mocDEF/ mocDER was employed in order to detection of rhizopine activity in the R. leguminosearum bv. trifolii strains recovered from Iranian clovers. None of the isolates investigated.
به منظور بررسی روابط ژنتیکی جمعیت جدایه های leguminosarum bv . trifolii Rhizobium همزیست با گونه های مختلف شبدر در خاک مناطق جغرافیایی مختلف، نمونه های خاک از هفت منطقه کشور شامل استان های لرستان، اصفهان، خراسان، همدان، کرمانشاه، کردستان و آذربایجان غربی جمع آوری گردید و بذور سه گونه شبدر مصری، شبدر ایرانی و شبدر قرمز در خاک مناطق مذکور کاشته شد. به این ترتیب 21 گلدان با ترکیبات مختلف خاک-گونه گیاهی به منظور بررسی رابطه متقابل نژاد ریزوبیوم-گونه شبدر و منطقه جغرافیایی آماده گردید و در گلخانه نگهداری شد. پس از رشد گیاهان و تشکیل گره در ریشه ها, جدای های ریزوبیوم همزیست از این گره ها جداسازی و خالص شد که شامل 420 جدایه برای کل تیمارهای شبدر-منطقه بود. تنوع ژنتیکی جدایه های ریزوبیومی همزیست سه گونه شبدر در خاک هفت منطقه مذکور و رابطه متقابل خاک منطقه، گونه شبدر میزبان و ریزوبیوم همزیست با استفاده از روش انگشت نگاری rep-PCR با استفاده از آغازگر BoxAIR در طی سه مرحله بررسی گردید. در مرحله اول, تنوع ژنتیکی جدایه های بدست آمده از خاک هر منطقه , در مرحله بعدی اختلاف الگوی DNA جدایه های مربوط به سه گونه مختلف شبدر در یک خاک مشخص مطالعه شد و در نهایت نیز ایزوله های جدا شده از گونه های مختلف، در مقایسه دوبه دوی خاک ها مورد بررسی قرار گرفتند. تعداد و فراوانی جدایه های مورد بررسی، در هر یک از این مراحل به کمک دو شاخص فراوانی نژادی (Strain richness) و غالبیت نژادی (Strain dominance) تعیین گردید. از میان 21 تیمار مختلف مورد بررسی, تیمار خاک نطنز-شبدر ایرانی با شاخص فراوانی برابر با 62/0 بیشترین تنوع را نشان داد. همچنین نمونه خاک مربوط به استان کرمانشاه با فراوانی نژادی 33/0 دارای فراوان ترین تیپ نژادی و خاک لرستان با فراوانی نژادی 12/0 دارای کمترین فراوانی نژادی در میان هفت خاک مورد بررسی شناخته شد. مقدار فراوانی نژادی برای سه گونه شبدر قرمز، شبدر ایرانی و شبدر مصری نیز به ترتیب برابر با 3/0، 28/0 و 23/0 به دست آمد. در این تحقیق از میان 152 ایزوله مورد بررسی، 23 نژاد مختلف در ارتباط با سه گونه شبدر در خاک های تحت مطالعه شناسایی شد. در میان نژادهای شناسایی شده، نژاد شماره 9 با شاخص فراوانی 16/0 دارای بالاترین غالبیت نژادی بود. با استفاده از داده های حاصل از انگشت نگاری مبتنی بر Box-PCR، فواصل ژنتیکی نژادهای شناسایی شده با استفاده از ضریب تشابه جاکارد و روش UPGMA در نرم افزار NTSYS 2.0 بررسی شد. اگر چه مقایسه الگوهای انگشت نگاری تنوع بالایی را میان جدایه های مورد بررسی نشان داد، اما مقایسه ضرایب تشابه به دست آمده و دندوگرام مربوطه، رابطه خاصی را میان نژاد باکتری، نوع گونه شبدر و خاک منطقه نشان نداد. به منظور تعیین روابط فیلوژنی شناسایی شده در این تحقیق از تکنیک PCR-RFLP بروی ژن recA استفاده گردید. نتایج به دست آمده ت

ارتقاء امنیت وب با وف بومی