Skip to main content
SUPERVISOR
Badraldinebrahim Seyed tabatabaei,Seyed reze Zareie abarghoei,Nafiseh Nili
بدرالدین ابراهیم سیدطباطبایی (استاد راهنما) سیدرضا زارعی ابرقویی (استاد مشاور) نفیسه نیلی (استاد راهنما)
 
STUDENT
Moloud Ahmadi
مولود احمدی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1386

TITLE

The Effect of Anthocyanins of Pomegranate Skin on Atherosclerosis Plaque Formation in Rabbit Arteries and Proteomic Analysis
Pomegranate is an important source of bioactive compounds that has been used for usual consumption as well as folk medicine for many centuries. This fruit contains high amount of phenolic compound with health benefits such as antioxidant, anticancer, and neutraceutical properties. The antiatherogenic properties of pomegranate has been also attributed to its capacity to decrease oxidative stress, the hallmark of early atherogenesis. Anthocyanins, a subgroup of flavnoids of phenolic are known to be responsible for the pomegranate peel and flesh color. It has been shown that antioxidants increase number of EPCs and contribute to the attenuation of atherosclerosis plaque size The object of this project was the effect of pomegranate peel anthocyanins on atherosclerosis plaque formation and plaque proteomics analysis. The anthocyanins of pomegranate peel were extracted using aciditic ethanol. Total polyphenolic compounds were determined 90.14 µg/µl according to the Folin-Ciocalteu procedure. Antioxidant activity of extract was determined using DDPH system and this extract shows 50% antioxidant activity in 3 microgram. Rabbits were assigned in 3 groups by standard diet, 1% high-cholesterol diet (HC group, n=6), or high-cholesterol diet with oral administration of an anthocyanin rich extract from pomegranate skin(HC+Pom group, n=6) for 8 weeks. Atherosclerotic plaque size was significantly reduced in anthocyanin fed rabbits in comparison to the control group and in threated group calcification was not observed. Alteration of MMPs was analyzed by gelatine zymography. The result of zymography shows increasing amount of MMP2 and MMP9 in cholesterol group in comparision to treated group and negative control. EPC (CD34+VEGF-R2+) circulating levels were evaluated in peripheral blood by Flowcytometry. CD34+ /KDR+ cells were significantly higher in treated group than cholesterol group (9.95±1.6 vs. 3.6±2.2, p 0.05). By the end of this research we studied the difference of aorta proteins between tree groups with two-dimentional electrophoresis and important difference between negative group and two other groups was observed. In this study for the first time beneficial consequence of pomegranate skin anthocyanins in prevention of this disease was reported. Dramatic alterations in the protein expression profile of aorta tissue was detected after the development of AS disease in rabbits. Investigationof the relationship between the differentially expressed proteins andthe initiation and development of the AS would be crucial for theunderstanding of the mechanism(s) of the disease and possible discovery of novel diagnosis markers and therapeutic approaches. Key words: Pomegranat, Antioxidant, Anthocyanin, Atherosclerosis, Proteomics
انار یکی از غنی ترین منابع ترکیبات زیست فعال بوده که مصارف فراوانی در تغذیه? صنعت و مواد دارویی داشته و قدمت استفاده از آن در طب سنتی به قرن ها پیش باز می گردد. انار حاوی مقادیر زیادی از ترکیبات فنلی می باشد که خاصیت آنتی اکسیدانی? ضد سرطان? ضد تصلب شرائین و زیست تغذیه ای بسیاری از آن ها شناخته شده است. آنتوسیانین ها به عنوان زیر گروهی از فلاونوئیدها (از گروه ترکیبات فنلی) دارای خاصیت آنتی اکسیدانی قابل توجهی می باشند. با توجه به تائید سرطان زا بودن آنتی اکسیدان های سنتزی? هدف از انجام این تحقیق بررسی اثر عصاره غنی از آنتوسیانین پوست انار در کاهش تشکیل پلاک آترواسکلروسیس در رگ و آنالیز پروتیومیکس آن در نظر گرفته شد. استخراج از پوست انار به روش اتانول اسیدی انجام شد. محتوای فنولی این عصاره با روش فولین-سیوکالتو به میزان 14/90 به دست آمد. خاصیت آنتی اکسیدانی این عصاره با استفاده از روش DPPH اندازه گیری شد و این عصاره در غلظت 3 میکروگرم بر میلی لیتر 50 درصد خاصیت آنتی اکسیدانی از خود نشان داد. خرگوش ها به طور تصادفی به مدت دو ماه در سه گروه کنترل منفی با جیره غذایی استاندارد? هیپرکلسترول با یک درصد کلسترول و تیمار با یک درصد کلسترول و 1/0 درصد عصاره آنتوسیانینی نگهداری شدند. نتایج هیستولوژی نشان داد که تشکیل پلاک آترواسکلروسیس در گروه تیمار نسبت به گروه هیپرکلسترول به طور قابل توجهی کاهش یافت و در گروه تیمار بر خلاف گروه کلسترول کلسیفیکاسیون مشاهده نشد. تغییر در میزان ماتریکس متالوپروتئیناز ها با استفاده از ژلاتین زیموگرافی بررسی شد. نتایج زیموگرافی نمایانگر افزایش میزان MMP2 و MMP9 در گروه هیپر کلسترول نسبت به گروه تیمار و کنترل منفی بود. سلول های اندوتلیال پروجنیتور توسط Flowcytometry ارزیابی شدند. میزان این سلول ها در گروه تیمار نسبت به گروه کلسترول به میزان قابل توجهی افزایش یافت و تفاوت در سطح p 0/05 معنی دار بود. در این تحقیق تفاوت ها در الگوی پروتئینی رگ با استفاده از الکتروفورز دو بعدی بررسی شد و تفاوت های زیادی در بین گروه کنترل منفی و دو گروه دیگر مشاهده شد که احتمالاً تفاوت های موجود مانند دیگر بررسی های انجام شده مربوط به بررسی الگوی پروتئینی رگ آئورت در طول آترواسکلروسیس مربوط به فرایند های التهابی و آنزیم های آنتی اکسیدانی و پروتئین های مربوط به سنتز چربی می باشد.در این مطالعه برای نخستین بار اثرات مفید آنتوسیانین های پوست انار در جلوگیری از تصلب شرائین و تغییرات مفید فاکتورهای وابسته به این بیماری گزارش شد. واژگان کلیدی: انار? آنتی اکسیدان? آنتوسیانین? تصلب شرائین? پروتیومیکس

ارتقاء امنیت وب با وف بومی