Skip to main content
SUPERVISOR
حمیدرضا رحمانی (استاد راهنما) مهدی حاجیان حسین آبادی (استاد مشاور) محمدحسین نصراصفهانی (استاد راهنما)
 
STUDENT
Nima Azari Dolatabad
نیما آذری دولت آباد

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1391
In vitro embryo production (IVEP) is concerned as one of the most important aspects of modern science. IVEP is a beneficial and valuable method for economical production of animal. Oocytes retrieved from ovine ovaries that are used to IVEP, are heterogeneous in terms of quality and developmental competence. Because the poor quality of the oocyte at the onset of maturation, IVEP is inefficient. Oocytes retrieved of ovaries are heterogeneous population of both growing oocytes (BCB-) and fully grown oocytes (BCB +). In this heterogeneous population, there is a delay in the maturation of oocytes which may be because of the BCB-oocytes in this population, so that this type of oocytes have an asynchronization between cytoplasmic and nuclear maturation. Therefore, the developmental capacity of BCB- oocytes is lower than BCB+ oocytes. In addition, the pre- maturation culture (PMC) oocyte before oocyte maturation has been suggested to improve development of oocyte. Second messenger cyclic adenosine mono-phosphate (cAMP) has been proven (cAMP) plays an essential role in the induction of meiotic arrest and the phosphodiesterase type 3 enzyme in oocytes and adenylyl cyclase enzyme in cumulus cells by degrading and synthesis cAMP, result in decrease and increase respectively the level of the second messenger in the oocyte. Thus, the use of inhibitors of phosphodiesterase type 3 and activator of adenylate cyclase can increase the level of cAMP in the oocyte and thus induce meiotic arrest. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect of cilostamide (an inhibitor of PDE3) and / or Forskolin (an activator of adenylate cyclase) on meiotic arrest and developmental rate ovine BCB-oocytes were isolated by BCB test. Accordingly, a two-step culture system consisting of 6, 8, 10 and 22 hours of culture in the presence of 1 µM cilostamide and / or 50 µM Forskolin, followed by 22 h of culture in maturation medium was designed. The results showed that during the 6 hours PMC, Forskolin significantly meiotic arrest BCB- oocytes at GV stage increased (P 0.05) and then cilostamide and the combination of these two drugs was better effect. Moreover, Forskolin significantly increased the rate and quality of blastocysts derived from ovine BCB- oocytes (P 0.05). Therefore, it was concluded that a two-step culture system may improve the developmental competence of in vitro ovine BCB- oocytes. Keywords : Ovine, two-step culture, PMC, BCB test, embryonic development
امروزه تولید آزمایشگاهی جنین (IVEP) به عنوان یکی از مهم ترین جنبه های علم مدرن مورد توجه است. IVEP روشی مفید و با ارزش برای تولید حیوانات، به لحاظ اقتصادی می باشد. اووسیت های برداشته شده از تخمدان های گوسفندی که برای IVEP استفاده می شوند به لحاظ کیفیت و شایستگی تکوینی هتروژنوس هستند. به دلیل کیفیت پایین اووسیت در شروع بلوغ، IVEP ناکارامد است. اووسیت های برگرفته از تخمدان ها جمعیت هتروژنوسی از هر دو گروه اووسیت های در حال رشد (BCB-) و اووسیت های کامل رشد یافته (BCB+) هستند. در این جمعیت هتروژنوس، یک تأخیر در بلوغ وجود دارد که می تواند به دلیل وجود اووسیت های BCB- در این جمعیت باشد، به طوریکه این دسته از اووسیت ها یک عدم همزمانی بین بلوغ سیتوپلاسمی و بلوغ هسته ای دارند. به همین دلیل، ظرفیت تکوینی اووسیت های BCB- از اووسیت های BCB+ پایین تر است. علاوه بر این، کشت پیش از بلوغ اووسیت (PMC)، قبل از بلوغ آزمایشگاهی برای بهبود تکوین اووسیت پیشنهاد شده است. ثابت شده است که پیامبر ثانویه آدنوزین مونو فسفات حلقوی (cAMP) نقش اساسی در القای توقف میوزی ایفا می کند و آنزیم فسفودی استراز نوع 3 درون اووسیت و آدنیلیل سیکلاز درون سلول های کومولوس به ترتیب با تجزیه و سنتز cAMP باعث کاهش و افزایش سطح این پیامبر ثانویه درون اووسیت می شوند. بدین ترتیب استفاده کردن از عوامل مهار کننده فسفو دی استراز نوع 3 و فعال کننده آدنیلات سیکلاز می تواند باعث افزایش سطح cAMP درون اووسیت شده و در نتیجه باعث القای توقف میوزی شوند. بنابراین، هدف این مطالعه بررسی تأثیر سیلوستاماید (یک مهار کننده PDE3) و / یا فورسکولین (یک فعال کننده آدنیلات سیکلاز) بر توقف میوزی و نرخ تکوینی اووسیت های BCB- گوسفندی جدا سازی شده بر اساس تست BCB بود. بر این اساس، یک سیستم کشت دو مرحله ای شامل 6، 8 ، 10 و 22 ساعت کشت در حضور 1 میکرومولار سیلوستاماید و / یا 50 میکرومولار فورسکولین و به دنبال آن 22 ساعت کشت در محیط بلوغ طراحی شد. نتایج نشان داد که فورسکولین در طی 6 ساعت PMC به طور معنی داری توقف میوزی اووسیت های BCB- را در مرحله GV افزایش داد (P 0.05) و نسبت به سیلوستاماید و ترکیب این دو دارو تأثیر بهتری داشت. علاوه بر این، فورسکولین به طور معنی داری نرخ و کیفیت بلاستوسیست های حاصل شده از اووسیت های BCB- گوسفندی را افزایش داد (P 0.05). بنابراین، نتیجه گرفته شد که سیستم کشت دو مرحله ای ممکن است شایستگی تکوینی آزمایشگاهی اووسیت های BCB- گوسفندی را بهبود ببخشد. واژه های کلیدی : گوسفند، کشت دو مرحله ای، تست BCB، تکوین جنینی

ارتقاء امنیت وب با وف بومی