Skip to main content
SUPERVISOR
Sabihe Soleimanianzad,Mahmoud SheikhZeinodin,Shahram Dokhani
صبیحه سلیمانیان زاد (استاد راهنما) محمود شیخ زین الدین (استاد راهنما) شهرام دخانی (استاد مشاور)
 
STUDENT
Somayeh Zolfaghari
سمیه ذوالفقاری

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1385

TITLE

Identification and comparison of technological properties of Lactobacillus bulgaricus present in local and industrial yoghurts in order to determine potential of local starters to be used in yoghurt industry
Starter culture used in yoghurt processing is normally a mixture of Lactobacillus delbrueckii su.bulgaricus (known as Lactobacillus bulgaricus ) and Streptococcus salivarius su.thermophilus (known as Streptococcus thermopiles ). It is known that more rapid acid development is observed in mixed cultures of two bacteria than in the single strain cultures due to a symbiotic relationship between these two species of bacteria. Lactobacillus bulgaricus is a gram-positive, thermophilic microorganism used in the production of numerous dairy products, including Swiss cheese, Mozzarella cheese and yoghurt. This bacterium contributes to fast lactic acid development in yoghurt and also to its flavour and textural properties. Naturally, bacteria isolated from Iranian yoghurts are better adapted to climate of Iran and their products are perfectly matched to taste of Iranian customers. The aim of present study was to isolate, identify and characterize Lactobacillus bulgaricus from Iranian local yoghurts and then assess their potential to be used in dairy industries as yoghurt starters. Sixty one yoghurt samples from rural area from 15 provinces, mainly Isfahan , were collected and transferred to biotechnology laboratory. Isolates were identified to species level using morphological and biochemical tests including gram-staining, catalase, spore formation, growth of isolates in different temperatures and in the presence of different concentration of NaCl and fermentation of different sugars. CR molecular method was preformed aiming for more accurate identification of isolates to sub-species level using primer pair of LB1:5?-AAAAATGAAGTTGTTTAAAGTAGGTA-3? and LLB: 5?-AAGTCTCCTGGCTGG-3?. In total 72 out of 102 isolates characterized as Lactobacillus delbrueckii su.bulgaricus and their potential to be used as starter in yoghurt processing were compared with 5 commercial strains purchased from CHR Hansen and Wisby manufactures. For assessment of potential of local starters to produce acid, Skim-milk (10%) was inoculated by microbial suspension with OD 650 =1 and incubated at 42°C for 5h, pH of samples were measured in 30 min intervals. Standard loop test was carried out to determine the ability if different isolates to produce EPS. To compare the performance of the local isolates
باکتری لاکتوباسیلوس بولگاریکوس، یکی از دو عضو گروه باکتری های آغازگر ماست، اهمیت زیادی در فرآیند تولید ماست دارد. زیرا از یک سو در تولید اسید و از سوی دیگر در ایجاد مواد مولد عطر و طعم در ماست نقش بسیار مهمی را ایفا می کند. از آنجا که آغازگرهای بومی هر کشوری دارای بیشترین سازگاری با شرایط آب و هوایی و ذائقه مصرف کنندگان آن کشور هستند و با توجه به اینکه در حال حاضر در کشور ایران هیچ موسسه ای در زمینه تولید باکتری های آغازگر از منابع بومی فعالیت ندارد، جداسازی و شناسایی این باکتری ها و خصوصاً لاکتوباسیلوس بولگاریکوس از منابع ماست های سنتی امری ضروری است. به این منظور طی شش ماه از تیر 1386، 61 نمونه ماست از استان های مختلف و عمدتاً استان اصفهان جمع آوری و به آزمایشگاه میکروبیولوژی گروه علوم و صنایع غذایی منتقل شد. از ماست های جمع آوری شده، جنس لاکتوباسیلوس با استفاده از محیط کشت MRS و دمای 42 درجه سانتی گراد و 10% گاز دی اکسید کربن جداسازی شد. در ادامه با استفاده از روش های بیوشیمیایی، گونه های وابسته به این جنس شناسایی شد. این روش ها شامل تخمیر قند های مختلف و رشد در دماها و غلظت های مختلف نمک بود. به منظور شناسایی جدایه ها در سطح زیر گونه، تکنیک مولکولی PCR استفاده شد. پس از استفاده از روش های فوق در شناسایی جدایه ها، 70 جدایه به عنوان باکتری لاکتوباسیلوس دلبروکی زیرگونه بولگاریکوس تأیید شدند. برای مقایسه خصوصیات تکنولوژیکی این زیر گونه های بومی با انواع صنعتی، 5 سویه تجاری نیز متعلق به کمپانی Haen و Wiy به عنوان شاهد استفاده شدند. برای بررسی توان تولید اسید در آغازگرهای مختلف، پژوهشی در قالب طرح اسپلیت فاکتوریل در چهار تکرار انجام شد . به این منظور از محیط کشت Skim-milk با غلظت 10% و دمای 42 درجه سانتی گراد و زمان تخمیر 5 ساعت استفاده شد. سپس در طرحی کاملاً تصادفی در سه تکرار با استفاده از گروه های سه تایی آغازگر شامل مخلوط 1:1 از دو نوع لاکتوباسیلوس بولگاریکوس اسیدساز و بافت ساز و سپس ترکیب مخلوط مذکور با نسبت 1:1 با یک سویه تجاری استرپتوکوکوس ترموفیلوس ، در محیط شیر، ماست تولید شد و خصوصیات فیزیکوشیمیایی ماست ها شامل کاهش pH و افزایش اسیدیته و تغییرات ویسکوزیته ،در دمای 4 درجه سانتی گراد و به مدت 15 روز اندازه گیری شد. تجزیه آماری داده های به دست آمده از این پژوهش، با نرم افزار SAS انجام شده و برای مقایسه میانگین ها از آزمون Lsdاستفاده شد. بر اساس نتایج تست های تولید اسید و تولید اگزوپلی ساکاریدها ، معلوم شد که آغازگرهای بومی در مقایسه با آغازگرهای تجاری دارای قدرت بیشتری در تخمیر شیر و ایجاد بافت مطلوب هستند.این آغازگرها به 4 گروه دسته بندی شدند: آغازگرهایی که فقط از نظر تولید اسید قوی بودند، آغازگرهایی که فقط از نظر تولید اگزوپلی ساکاریدها قوی بودند، آغازگرهایی که هم از نظر تولید اگزوپلی ساکارید و هم از نظر تولید اسید قوی ظاهر شدند و آغازگرهایی که هم در تخمیر لاکتوز وهم در تولید اسید ضعیف عمل کردند. با توجه به داده های آماری به دست آمده معلوم شد در همه خصوصیات مورد اندازه گیری برای ماست ها نیز، آغازگرهای بومی نسبت به آغازگرهای تجاری، به طور آشکار و معنی داری باعث بهبود خواص ماست شدند. در مدت انبار داری نیز، آغازگرهای بومی فعالیت بیش اسیدسازی ضعیف تری را نشان دادند و دارای ماندگاری بیشتری در انبار 4 درجه بودند. به طوریکه در مدت 15 روز انبارداری تنها سبب کاه

ارتقاء امنیت وب با وف بومی