Skip to main content
SUPERVISOR
Mohammad ali Edriss,Bahram Sharifnabi,Hamid reza Rahmani
محمدعلی ادریس (استاد راهنما) بهرام شریف نبی (استاد مشاور) حمیدرضا رحمانی (استاد راهنما)
 
STUDENT
Reza Batavani
رضا باتوانی

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده کشاورزی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1382

TITLE

Identification of Susceptible Codons to Scrapiein Three Iranian Breed Sheep
Scrapie belongs to a group of diseases called transmissible spongiform encephalopathy (TSE) diseases and appears in sheep and goats. Other diseases of this group include bovin spongiform encephalopathy (BSE) disease in cows and Creutzfeldt-Jacob disease (CJD) in humans. Scrapie is associated with the accumulation of an abnormal isoform of prion called scrapie prion protein (PrP sc ) in nerve cells. The normal form of this prion is called cellular prion protein (PrP c ). The polymorphs existing in the scrapie gene play a role in manifestation of the disease and susceptibility to it. There are different polymorphs in the scrapie gene of which those in the three codons 136, 154 and 171 are more important for susceptibility to scrapie. Different scrapie strains affect animals differently based on the polymorphs existing in the scrapie gene. Thus, the genotype VV 136 -- 154 -- 171 shows the highest susceptibility to the strain /1, whereas the genotype AA 136 RR 154 QQ 171 has high susceptibility to the strain CH1641. The genotype AA 136 RR 154 RR 171 is resistant to both scrapie strains. One hundred and fifty blood samples were collected from the three breeds of Naeini, Lori Bakhtyari and Zandi sheep and studied in order to identify the susceptible codons to scrapie. DNA extraction from blood samples was done through the modified salting out method. In order to study polymorphs in the codons in question, the PCR-RFLP method was applied. For this purpose, two PCR reactions were designed: one for the study of polymorphs in codons 136 and 154 and another for the study of polymorphs in the codon 171. At the PCR-RFLP stage, the enzyme PagI was used to study the polymorphs of codons 136 (Alanine, A/ Valine, V) and 154 (Histidine, H/ Arginine, R) and the enzyme BclI to study the polymorphs of the codon 171 (Glutamine, Q/ Arginine, R). The results of the study showed that the highly scrapie-susceptible genotype AA 136 RR 154 QQ 171 in the two breeds of Naeini and Zandi had the highest frequency (62% and 72% respectively) of all the genotypes. As for the Lori Bakhtyari breed, the genotype AA 136 HH 154 QQ 171 had the highest frequency (60%). However, the frequency of the highly susceptible genotype VV 136 -- 154 -- 171 in all three breeds and that of the susceptible genotype AV 136 -- 154 -- 171 in the Lori Bakhtyari were zero. The Lori Bakhtyari showed no polymorph in the two codons 136 and 171 where A and Q were the only alleles respectively. The completely resistant genotype AA 136 RR 154 RR 171 had not been seen in any of the breeds. The results of this study will constitute an advantageous background for further studies on
اسکراپی از دسته بیماری های موسوم به بیماری های ایجاد کننده فرم اسفنجی سیستم عصبی قابل انتقال (TSE) است که در گوسفند و بز تظاهر می کند. دیگر بیماری های این دسته شامل بیماری جنون گاوی (BSE) در گاو و بیماری کورتزفلدت-جاکوب (CJD) در انسان است. بیماری اسکراپی با تجمع یک فرم غیرطبیعی پروتئین پریون موسوم به پروتئین پریون اسکراپی (PrP SC ) در سلول های عصبی ارتباط دارد. فرم طبیعی این پروتئین، پروتئین پریون سلولی (PrP C ) نام دارد. چندشکلی های موجود در ژن اسکراپی در بروز بیماری، میزان حساسیت به بیماری و دوره کمون بیماری نقش دارند. چندشکلی های مختلفی در ژن اسکراپی وجود دارد که چند شکلی موجود در سه کدون 136، 154 و 171 اهمیت بیشتری در حساسیت به اسکراپی دارند. سویه های مختلف اسکراپی بر اساس چندشکلی های موجود در ژن اسکراپی حیوانات را به صورت متفاوتی تحت تأثیر قرار می دهند. به طوریکه ژنوتیپ های 171 -- 154 -- 136 VV بیشترین حساسیت را نسبت به سویه /1 از خود نشان می دهند و در مقابل ژنوتیپ 171 QQ 154 RR 136 AA نسبت به سویه CH1641 حساسیت بالایی دارد. ژنوتیپ 171 RR 154 RR 136 AA نسبت به هر دو سویه اسکراپی کاملاً مقاوم است. در این مطالعه بررسی روی150 نمونه خون گردآوری شده از سه نژاد گوسفند نائینی، لری بختیاری و زندی جهت شناسایی کدون های حساس به اسکراپی صورت گرفت. استخراج دی ان آ از نمونه های خون با روش بهینه شده استخراج نمکی انجام شد. جهت بررسی چند شکلی در کدون های مورد نظر از روش PCR-RFL استفاده شد. به این منظور دو واکنش PCR طراحی شد: یکی جهت بررسی چندشکلی کدون های 136 و 154 و دیگری جهت بررسی چندشکلی در کدون 171. در مرحله PCR-RFLP از آنزیم PagI جهت بررسی چندشکلی کدون های 136 (آلانین،A / والین،V) و 154 (هیستیدین،H / آرژینین، R) و از آنزیم BclI جهت بررسی چندشکلی کدون 171 (گلوتامین،Q / آرژینین، R) بهره گرفته شد. نتایج این مطالعه نشان می دهد که ژنوتیپ بسیار حساس به اسکراپی ( 171 QQ 154 RR 136 AA) در دو نژاد نائینی و زندی بیشترین فراوانی ها را ( به ترتیب 62 در صد و 72 در صد ) در بین دیگر ژنوتیپ ها به خود اختصاص داده است. در نژاد لری بختیاری ژنوتیپ 171 QQ 154 HH 136 AA بیشترین فراوانی ( 60 در صد ) را نشان می دهد. این در حالی است که فراوانی ژنوتیپ بسیار حساس 171 -- 154 -- 136 VV در هر سه نژاد و فراوانی ژنوتیپ حساس 171 -- 154 -- 136 AV در نژاد لری بختیاری صفر است. نژاد لری بختیاری در کدون 136 و 171چند شکلی نشان نمی دهد و تنها آلل آنها به ترتیب A و Q است. ژنوتیپ کاملاً مقاوم AARRRR در هیچ کدام از نژاد ها مشاهده نشده است. نتایج این مطالعه پیش زمینه مناسبی جهت بررسی بیشتر روی سویه های مختلف اسکراپی در ایران و برنامه های اصلاح نژادی جهت کاهش فراوانی ژنوتیپ های حساس به اسکراپی ایجاد می کند.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی