Skip to main content
SUPERVISOR
محمدرضا وهابی (استاد راهنما) پوراندخت گلکار تفت (استاد راهنما) مرضیه تقی زاده (استاد مشاور)
 
STUDENT
ESMAT YAZDANIYAN
عصمت یزدانیان

FACULTY - DEPARTMENT

دانشکده منابع طبیعی
DEGREE
Master of Science (MSc)
YEAR
1397

TITLE

The effects of methyl jasmonate on secondary metabolites in Allium jesdianum Boiss & Buhse by callus culture
The present study was carried out to determine the best pre-sowing 15 different treatments for seed germination in Allium jesdianum ( A. jesdianum ). The highest seed germination (58.33%) was observed at chemichal treatment including NAA (1 mg/L) + BAP (3 mg/L) of hypocotyl explants on Murashige and Skoog (MS) media. The highest callus induction (86.7% ) was recorded at naphthalene acetic acid (1 mg/L) + benzyl amino purine ( 3 mg/L)which was supported at MS/2 media, among diffferent combinations of plant growth regulators. Two elicitor including methyl jasmonate (MeJ) ( 0, 25, 50 and 100 µM ) and Putrescine (0, 0.5 and 1 mM) were used to investigate their effects on lipid peroxidation, callus growth, total phenolics content (TPC), the content of total flavonoid (TFD), total flavonols (TFL), Anthocyanin (Ant), chlorophyll, carotenoid and antioxidant activity through DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method under callus culture. The results showed the superiority of MeJ over Put for the content of secondary metabolites and antioxidant activity in callused of A. Jesdianum . The highest TPC ( 6.02 mg GAEg -1 FW) TFD ( 0.52 mg QEg -1 FW) TFL ( 0.39 mg QEg -1 FW) were observed at 50 µ M of MeJ, but the highest value for anthocyanin ( 8.99 µ mol g -1 FW) was achieved at 25 µM of MeJ. The maximum DPPH activities were observed at 50 and 100 µ M of MeJ. utrescine (0.5 mM) elicitation showed only superiority for callus growth rate (0.53 mm/day) and carotenoids (0.045 mg g ?1 DW). Thus, new protocols have been developed for seed germination, callus induction and the elicitors-induced enhancement of metabolites and antioxidant activity in callus culture of A. Jesdianum .
امروزه بسیاری از گونه‌های گیاهی مهم در اکوسیستم‌های مرتعی به دلایل مختلف در حال انقراض هستند. روش کشت بافت گیاهی برای حفاظت از این گونه‌های گیاهی در معرض خطر، یک روش کاربردی است. این مطالعه به منظور بهینه‌سازی تولید کالوس و سپس بررسی واکنش بن‌سرخ( Allium jesdianum ) تحت افزودن الیسیتورهای پوتریسین و متیل جاسمونات در شرایط درون شیشه‌ای انجام گرفت. در ابتدا جوانه‌زنی بذر به منظور تولید گیاهچه در تیمارهای مختلف مورد بررسی قرار گرفت. ترکیب هورمون های رشدی 3 میلی‌گرم/ لیترنفتالین استیک اسید و 1 میلی‌گرم/ لیتر بنزیل آمینو پورین در بذوری که 2 ماه سرمادهی داشتند، بهترین ترکیب از نظر سرعت جوانه‌زنی(74/1 میلی‌متر/روز) شناخته شد. ترکیب هورمونی 1میلی‌گرم/ لیترنفتالین استیک اسید و3 میلی‌گرم/ لیتر بنزیل آمینو پورین از نظر درصد جوانه زنی (33/58) بهترین پاسخ را نشان داد . سپس ریزنمونه‌های بذر و هیپوکوتیل به منظور تولید کالوس به محیط‌های حاوی ترکیبات رشدی مختلف منتقل شدند. نتایج تجزیه واریانس نشان داد که متغییرهای هورمونی تاثیر معنی‌داری بر روی درصد کالوس‌زایی و سرعت رشدکالوس داشتند، تیمار ترکیب رشدی 1 میلی‌گرم/ لیترنفتالین استیک اسید+3 میلی‌گرم/ لیتربنزیل آمینو پورین در محیط کشت موراشیک و اسکوگ و بر روی ریز نمونه هیپوکوتیل بهترین درصد تولید کالوس (7/86) را نشان داد. به منظور بررسی تاثیر الیسیتورهای مختلف هورمونی بر روی میزان متابولیت های ثانویه در کالوس، غلظت های مختلف پوتریسین( 0، 5/0 و 1 میلی‌مولار) و متیل جاسمونات( 0 ، 25، 50 و 100 میکرو‌مولار) به عنوان الیسیتور انتخاب شدند. اثرات آن‌ها برمحتوای مالون دی آلدهید، رشد کالوس، محتوای کل فنول ، محتوای کل فلاونوئید، محتوای کل فلاونول، آنتوسیانین، محتوای کل کلروفیل، کارتنوئید و فعالیت آنتی اکسیدانی به روش DPPH مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که متیل جاسمونات نسبت به پوتریسین نتایج بهتری بر محتوای متابولیت‌های ثانویه و فعالیت آنتی اکسیدانی در کالوس ایجاد کرده است. بالاترین میزان فنول (02/6 میلی‌گرم گالیک اسید/ وزن تر)، فلاونوئید(52/0 میلی‌گرم کوئرستین/ وزن تر)، فلاونول(39/0 میلی‌گرم کوئرستین/ وزن تر) در تیمار متیل جاسمونات با غلظت 50 میکرومولار و بیشترین میزان برای آنتوسیانین (99/8 میکرومول گرم/ وزن تر) در تیمار متیل جاسمونات25 میکرومولار مشاهده شد. حداکثر فعالیت آنتی اکسیدانی در متیل جاسمونات 50 میکرومولار (75/82 درصد) و 100 میکرومولار(40/86 درصد) مشاهده شد. الیسیتور پوتریسین با غلظت 5/0 میلی مولار از نظر سرعت رشد کالوس(53/0 میلی‌متر/ روز) و میزان کارتنوئید (045/0 میکروگرم/گرم وزن تر) دارای نتایج بهتری بود. این مطالعه برای اولین بار پروتکول جدیدی برای جوانه‌زنی بذر، القای کالوس و همچنین تاثیر الیسیتورهای مختلف بر محتوای متابولیت‌های ثانویه و فعالیت آنتی اکسیدانی در کشت کالوس بن سرخ ارایه ارائه داده است که نتایج آن می تواند در تحقیقات آتی این گیاه ارزشمند داروئی مورد استفاده قرار بگیرد.

ارتقاء امنیت وب با وف بومی